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      6-磷酸葡萄糖脫氫酶試劑盒太棒了!

      更新時間:2017-11-20      瀏覽次數:1482

      6-磷酸葡萄糖脫氫酶試劑盒太棒了!

      測定意義:
      G6PDH(EC 1.1.1.49)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是磷酸戊糖途徑的關
      鍵酶,催化 6-磷酸葡萄糖氧化為 6 -磷酸葡萄糖酸內酯,同時將NADP+還原為NADPH,供
      生物合成及維持細胞內的還原狀態用。因此6-磷酸葡萄糖脫氫酶活性的高低可以從一定程
      度上反映出生物體的生物合成和抗氧化能力。
       

      測定原理:
      G6PDH 催化NADP+還原生成NADPH,在340 nm 下測定NADPH 增加速率。
       

      需自備的儀器和用品:
      紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL 石英比色皿、研缽、冰和蒸
      餾水。
       

      試劑的組成和配制:
      提取液:60mL×1 瓶,4℃保存;
      試劑一:液體47.5 mL×1 瓶,4℃保存;
      試劑二:粉劑×1 支,-20℃保存;
      試劑三:粉劑×1 支,-20℃保存;

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      測定步驟:
      1、 分光光度計預熱30min 以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。
      2、 將試劑二和試劑三轉移至試劑一中充分溶解;在37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)
      水浴10min 以上;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。
      3、 在1mL 石英比色皿中加入50μL 樣本和950μL 試劑一,混勻后立即記錄340nm 處1min
      后吸光值A1 和 6min 后的吸光值A2,計算ΔA=A2-A1。
       

      注意:若ΔA 大于0.5,需將酶液用提取液稀釋,計算公式中乘以相應稀釋倍數。或將反應
      時間縮短至2min,使A2-A1 小于0.5,可提高檢測靈敏度。

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