Western blot細胞樣本的處理小貼士

Western blot細胞樣本的處理小貼士

上海信帆生物代做Western blot實驗，下面我們給大家分享一下細胞樣本中關于懸浮細胞和貼壁細胞樣本的處理方法，希望對大家有所幫助，如果還有不清楚的地方，上海信帆生物科技有限公司，您身邊的科研專家！

細胞樣本做WB檢測
1、懸浮細胞樣品：把細胞及培養液一起收集到15ml或者50ml離心管中，1500rpm離心3min，棄去上清；加入PBS輕輕吹打，1500rpm離心3min，棄去上清；反復3次，棄去上清后于-80度或者液氮凍存待用。在避免凍融的情況一般保存1年，建議盡快檢測。

2、貼壁細胞樣品：
2.1 胰酶消化：用胰酶將細胞消化后，收集到15ml或者50ml離心管中，1500rpm離心3min，棄去上清；加入PBS輕輕吹打，1500rpm離心3min，棄去上清；反復3次，棄去上清后于-80度或者液氮凍存待用。在避免凍融的情況一般保存1年，建議盡快檢測。

2.2 細胞刮子收集細胞：對于某些蛋白（即對胰酶比較敏感或者實驗特殊要求，如E-Cadherin不易用胰酶消化后進行WB檢測），直接用細胞刮子刮下細胞，收集到EP、15ml或者50ml離心管中，1500rpm離心3min，棄去上清；加入PBS輕輕吹打，1500rpm離心3min，棄去上清；反復3次，棄去上清后于-80度或者液氮凍存待用。在避免凍融的情況一般保存1年，建議盡快檢測。

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