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      檢測高密度脂蛋白對于血清和組織樣本的處理方法匯總

      更新時間:2018-05-15      瀏覽次數:3256

      檢測高密度脂蛋白對于血清和組織樣本的處理方法匯總?!

      上海信帆生物代理銷售低密度脂蛋白檢測試劑盒和高密度脂蛋白檢測試劑盒,產品現貨供應,提供實驗代測服務,歡迎大家!

       樣本處理:

      血清(漿):直接測定,如超過線性范圍用生理鹽水稀釋后測定。 ②、培養液樣本:吸取培養液,1000 轉/分,離心 10 分鐘,取上清測定。

       [注]:一般建議細胞密度在 100萬個/ml以上。 ③、組織樣本:準確稱取組織重量,按重量(g):體積(ml)=1:9 的比例,加入 9 倍體積的勻漿介 質,冰水浴條件下機械勻漿,2500 轉/分,離心 10 分鐘,取上清液待測。

       [注]:1、如組織樣本為非高脂樣本,勻漿介質統一用磷酸鹽緩沖液(0.1mol/L pH 7.4)或生理鹽水進行提取。

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       2、如組織樣本為高脂樣本或部分為高脂樣本,勻漿介質可統一用無水乙醇進行提取。 

      細胞樣本: A、細胞收集:將制備好的細胞懸液取出,1000 轉/分,離心 10 分鐘,棄上清液,留細胞沉 淀;用等滲緩沖液(推薦0.1mol/L 、pH7~7.4 磷酸鹽緩沖液)清洗1~2 次,同樣1000 轉/分,離心10 分鐘,棄上清液,留細胞沉淀;

       B、細胞破碎:加入 0.2~0.3ml 的勻漿介質(推薦 0.1mol/L、pH7~7.4磷酸鹽緩沖液或生理 鹽水)進行勻漿,冰水浴條件下超聲破碎(功率:300W,3~5 秒/次,間隔 30 秒,重復 3~5  次)或手動勻漿,制備好的勻漿液不離心直接測定。也可采用裂解液裂解(推薦 TritonX-100,1~2%,裂解 30~40分鐘),裂解好的液體不離心直接測定。 

      [注]:一般建議細胞密度在 100萬個/ml以上。破碎好的液體可顯微鏡觀察細胞是否破碎* 

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