多聚甲醛固定細胞的原理你清楚嗎

多聚甲醛固定細胞的原理

多聚甲醛固定細胞時，能使細胞內的自由氨基基團發生化學交聯，形成一網狀結構，把細胞的各個結構成分連接起來。但單獨用多聚甲醛固定細胞不能使抗體進入細胞內，因此，標本經固定后必須用非離子去污劑透化標本。商業甲醛溶液不能用于細胞染色固定，因為其不具有多聚甲醛固定細胞的優點，且細胞會被甲醇固定。

固定液可使細胞或組織的蛋白質凝固，終止內源性或外源性酶反應，防止組織自溶或異溶，以保持原有結構和形態。對免疫組化而言更有原位保存抗原的作用，避免抗原失活或彌散。固定液種類很多，常見的有多聚甲醛、甲醛、戊二醛、乙醇、丙酮等。其固定原理不同，各有優缺點。目前在科學研究中多聚甲醛應用，通過形成分子間的交聯從而使細胞或組織的三維結構得以被固定。多聚甲醛是甲醛的聚合物，性質比甲醛穩定，且對抗原的破壞能力弱于甲醛，因此，科學研究中常用多聚甲醛作為固定劑。

4%多聚甲醛固定液是一種廣泛用于免疫組化、免疫熒光(Immunofluorescence, IF)、免疫細胞化學、流式分析等檢測時組織、組織切片、細胞等生物樣品固定的溶液。本產品配制在PBS溶液中，可直接用于組織或細胞的固定，無需稀釋。若需使用低濃度多聚甲醛，可使用PBS按比例稀釋。

使用注意事項：

1、多聚甲醛放置過久其中的醛基可能會被氧化為酸，使溶液pH降低，從而影響染色。
2、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。
3、多聚甲醛雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過24小時。
4、多聚甲醛可長期存在于固定過的細胞或組織樣品中，固定完成后用適當的洗滌液或水沖洗數小時仍會有殘留，因此后續實驗結果如果受醛基影響，須盡量洗去殘留的多聚甲醛。
5、醛基與抗原蛋白的氨基交聯形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙。分子間交聯形成的網格結構可能部分或掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結果。因此，4%多聚甲醛固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原*行修復，然后才能進行免疫染色等后續操作。
6、本產品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。
7、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

8、本產品僅供科研實驗用，不做其它用途。