瘧原蟲染色液(吖淀橙染色液)的注意事項

瘧原蟲染色液(吖淀橙染色液)的注意事項

產品簡介:

抱子蟲無明顯運動細胞器，全部發育階段均營寄生生活。生活史較復雜，有無性的裂體增殖、抱子增殖和有性的配子生殖兩種生殖方式，并可以在同一個宿主或分別在兩個不同宿主體內完成。寄生于人體的抱子蟲主要有瘧原蟲、剛地弓形蟲、卡氏肺跑子蟲、隱抱子蟲等.瘧原蟲是營寄生生活的抱子蟲，主要寄生于人及多種哺乳動物，少數寄生于鳥類和爬行類動物，目前已知有 130 余種。寄生于人體的瘧原蟲主要有間日瘧原蟲、惡性瘧原蟲、三日瘧原蟲和卵形瘧原蟲等。瘧原蟲的基本結構包括胞核、胞質和胞膜，用瑞氏或吉姆薩染色后，胞核呈紫紅色，胞質為藍色。瘧原蟲在人體內先后在肝細胞和紅細胞內發育，而目其致病是在紅細胞內期裂體增殖時發生的。瘧原蟲在紅細胞內發育包括小滋養體、大滋養體、裂殖體和配子體四個階段，可通過瑞氏或吉姆薩染色觀察其不同時期的不同形態。

瘧原蟲的病原學檢查主要分為厚、薄血膜染色鏡檢法和血沉棕黃層定量分析法(QBC)。厚血膜中原蟲比較集中，易檢獲，但制片中紅細胞容易溶解，原蟲形態有所改變，蟲種鑒別比較困難;薄血膜中紅細胞不易被破壞，瘧原蟲形態結構較完整、典型，容易識別和鑒別蟲種，但原蟲密度低時容易漏檢，故常采用一張玻片同時制作厚、薄兩種血膜，用瑞氏、吉姆薩或吖院橙染色查找瘧原蟲的存在。QBC分析法的原理是由于感染瘧原蟲的紅細胞比正常紅細胞輕，而比白細胞略重，離心分層后，集中分布于正常紅細胞層的上部，白細胞層的下部，加入吖院橙試劑后，用熒光顯微鏡觀察結果，敏感度比普通鏡檢法高很多，更簡便、快捷，但費用較高。

瘧原蟲染色液(吖呢橙染色液)由吖橙和磷酸鹽等組成，主要是采用熒光染料吖院橙進行厚薄血膜的染色，通過滲透、吸附和化合等作用與寄生蟲或組織細胞的不同成分結合成為帶熒光的標本，再經過熒光光源的激發，使結合的熒光素的標本發出熒光，通過熒光顯微鏡在暗室中觀察瘧原蟲的存在，本法簡單、快捷，檢出率高于常規法。該試劑僅用于科研領域不適用于臨床診斷或其他用途。

產品組成：

自備材料：

1、蠟筆、甲醇、去離子水

2、載玻片、熒光顯微鏡、暗室

3、抗熒光淬滅封片劑

操作步驟(僅供參考):

1、制作血膜: 厚血膜比吉姆薩染色的厚血膜略薄，可用 3l 血涂成直徑為 1.2~1.5m 的亞厚血膜;薄血膜則不宜過薄，可在涂片時推片以 45°角涂成較厚的薄血膜

2、配制吖橙染色液:0.1ml 吖橙存液加入 9.9ml磷酸鹽緩沖液混合即成，可于 4C保存10~15 天。

3、染色前，先用蠟筆在厚薄血膜間劃一條橫線

4、用 0.5~1ml 甲醇固定薄血膜，清水溶去厚血膜上的血紅蛋白

5、吸取吖橙染色液滴加到血膜上，室溫避光染色 30s~120s，加蓋玻片6、熒光顯微鏡(激發濾光片波長 488nm ,阻斷濾光片波長 515nm) 暗室中觀察數并拍照不能及時觀察的可用抗熒光滅封片劑封片，可延緩熒光的淬滅

染色結果

瘧原蟲和白細胞的核呈現黃綠色熒光，胞漿呈橘紅色熒光

注意事項

1、涂制血膜用的載玻片使用前需經鉻酸洗液處理2、染色用的血膜厚薄應符合要求.

3、吖橙染色液一般建議臨用前稀釋，不宜存放過久4、滴加染色液應以覆蓋血膜為準

5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作

有效期 :12 個月有效。常溫運輸，4保存。

瘧原蟲染色液(吖淀橙染色液)的注意事項