DNS 試劑(NY/T 法)操作說明

DNS試劑(NY/T法)由氫氧化鈉、3,5-二硝基水楊酸、酒石酸鉀鈉、酚等配制而成，DNS濃度為6.3g/L，是植物總糖和還原糖檢測(硝基水楊酸法)的成分之一，其檢測原理是還原糖在堿性條件下被氧化成糖酸，3,5-二硝基水楊酸被還原為棕紅色的氨基化合物，在一定范圍內(nèi)還原糖的量與棕紅色產(chǎn)物的顏色深淺程度呈一定比例關(guān)系，在540nm處測定棕紅色物質(zhì)的吸光度，該吸光度值與還原糖含量呈線性關(guān)系，利用比色法和標(biāo)準(zhǔn)曲線測得樣品中的還原糖和總糖的含量。DNS試劑也常用淀粉酶、纖維素酶、木聚糖酶等的活性測定。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。 

產(chǎn)品名稱：DNS試劑(NY/T法)

產(chǎn)品貨號(hào)：XF0284

規(guī)格：100ml

儲(chǔ)存條件：室溫，避光

有效期：12個(gè)月

用途：農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)法DNS試劑。又稱3,5-二硝基水楊酸法或簡稱DNS法,DNS試劑是植物總糖和還原糖檢測(硝基水楊酸法)的成分之一,定量檢測植物組織樣品中的總糖和還原糖的含量。3,5-二硝基水楊酸濃度為6.3g/L。

自備材料：

1、蒸餾水、鹽酸溶液、氫氧化鈉溶液

2、剪刀、勻漿器或研缽、50ml 離心管、離心機(jī)、水浴鍋或恒溫箱、分光光度計(jì)、比色皿

操作步驟(僅供參考)：

1、還原糖的提取：

①稱取植物樣品 0.5~3g，剪碎，加入蒸餾水約 3ml 勻漿，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中，用12ml 蒸餾水沖洗研磨器 2~3 次，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。

②50℃水浴 30min，并不時(shí)攪拌，以便還原糖徹-底浸出。

③將沉淀和浸出液轉(zhuǎn)移至 50ml 離心管，4000g 離心。

④留取上清液，向沉淀中加入 20ml 蒸餾水，混勻，再次 4000g 離心。

⑤留取上清液，將 2 次獲得的上清液合并，用蒸餾水定容至 100ml(提取液)，混勻，作為還原糖待測液。

2、總糖的水解和提取：

①稱取植物樣品 0.5~3g，剪碎，加入蒸餾水約 3ml 勻漿，轉(zhuǎn)移至燒杯或三角瓶中，用12ml 蒸餾水沖洗研磨器 2~3 次，洗出液也轉(zhuǎn)移至該容器。

②向容器中加入 10ml 6M 鹽酸溶液，攪拌均勻，煮沸，并不時(shí)攪拌。

③取 2 滴滴加于載玻片上，滴加 1 滴顯色液，檢查水解是否完-全，如已經(jīng)水解完-全則不顯示藍(lán)色。

④水解完畢后，冷卻至室溫，加入 6M 氫氧化鈉溶液，使溶液 pH 至7.4 左右，用蒸餾水定容至 100ml，混勻，4000g 離心或過濾，獲得上清或?yàn)V液。

⑤取上清或?yàn)V液 10ml，用蒸餾水定容至 100ml，成稀釋 10 倍的總糖水解液(提取液)，取 1ml 總糖水解液，測定其還原糖的含量。