1. 熱門搜索: 肌酸激酶MB型同工酶(CK-MM)質控樣品 抗血漿鑒別試劑盒 甲種胎兒球蛋白抗原 重組核心鏈霉親和素 2(不帶標簽) 重組鏈霉親和素(r-ScSA)(NC膜專用) 重組鏈霉親和素(帶His標簽) 羊抗人視-黃醇結合蛋白多克隆抗體 大鼠白細胞介素1β(IL-1β)試劑盒(ELISA) 人堿性成纖維細胞生長因子ELISA試劑盒 1%豚鼠紅細胞 2%雞紅細胞 1%雞紅細胞 重組人線粒體核糖體蛋白S2(MRPS2) 重組人蛋白酶體激活物亞基1(PSME1)蛋白 重組人肝癌衍生生長因子相關蛋白3 重組人FAM83A蛋白

      PRODUCT CLASSIFICATION

      產品分類

      技術文章/ Technical Articles

      您的位置:首頁  /  技術文章  /  上海信帆生物-明膠酶譜法試劑盒檢測步驟

      上海信帆生物-明膠酶譜法試劑盒檢測步驟

      更新時間:2015-05-20      瀏覽次數:1863
       
        明膠酶譜法試劑盒檢測步驟
        1.制備含MMP底物蛋白的SDS-PAGE凝膠:推薦分離膠濃度為8%。按照標準程序制備SDSPAGE凝膠。將10×substrateG融化,并90ºC加熱5分鐘。分別在濃縮膠和分離膠中額外加入10×substrateG并使之稀釋10倍,混勻后加入過硫酸銨和TEMED,等待凝膠聚合。
        2.待測樣品1:1稀釋于2×SDS-PAGEnon-reducingbuffer(用完后可自行配制:4%SDS,100mMTris-ClpH6.8,20%glycerol,0.02%bromophnolblue),混合后直接上樣。切勿加熱變性,并且僅使用不加還原劑的上樣緩沖液。可通過預試驗確定加樣量,使用普通蛋白預染Marker即可。陽性對照(可選步驟):可取人、小鼠、大鼠或兔100μl全血與100μl2×SDS-PAGEnonreducingbuffer等體積混合,取5-15μl上樣。
        3.低電流恒流電泳,每一塊小膠電流為20mA/gel。溴酚藍跑出凝膠前沿時結束電泳。
        4.洗滌凝膠:取出凝膠,去除濃縮膠,放入容器內。可先用適量蒸餾水沖洗凝膠,然后加入10ml1×BufferA(用蒸餾水稀釋),室溫漂洗凝膠2×30分鐘。中間換液。
        5.孵育:倒掉BufferA。加入10ml1×BufferB(蒸餾水稀釋),室溫或37ºC孵育1~5小時。陽性對照或者血中的MMP通常37ºC孵育1小時即可顯示。如MMP活性低,應延長孵育時間為10小時或過夜。
        6.顯色:倒掉BufferB,加入SDS-PAGE凝膠蛋白質考馬斯亮藍染色液(操作步驟見SDS-PAGE凝膠蛋白質考馬斯亮藍染色液說明書)。凝膠的大部分區域被深染,在有MMP條帶的位置不被染色而形成透亮區域。透明區域的位置和范圍指示MMP-2、MMP-9的大小位置(酶譜)及活性。陽性對照將在66~72(MMP-2)、92(MMP-9)、130(proMMP-9)、225(proMMP-9)kDa
        位置出現透明條帶。
        7.條帶掃描:將凝膠放在掃描儀上掃描。雖然MMP條帶透明,但凝膠背景并非真正全黑。解決辦法:可用非透射光掃描,或用軟件圖像處理程序調整背景顯示為灰度顯示,并盡量設置為黑色。MMP條帶則為白色,這種背景黑條帶白的格式是英文論文中zui常見的格式。
      微信掃一掃

      郵箱:1170233632@qq.com

      傳真:021-51870610

      地址:上海市顧戴路2988號B幢7樓

      Copyright © 2025 上海信帆生物科技有限公司版權所有   備案號:滬ICP備13019554號-1    技術支持:化工儀器網

      TEL:13764793648

      掃碼加微信
      主站蜘蛛池模板: 亚洲成人黄色在线| 久久精品国产大片免费观看| 美女免费视频一区二区| 成人影片一区免费观看| 亚洲黄色免费电影| 午夜国产大片免费观看| 亚洲福利视频导航| 国产91成人精品亚洲精品| 国产成人精品免费久久久久| 国产成人免费a在线视频app| 久久精品亚洲视频| 污网站免费在线观看| 中国xxxxx高清免费看视频| 亚洲精品麻豆av| 亚洲国产精品一区二区三区在线观看 | 一区二区三区观看免费中文视频在线播放 | 精品国产麻豆免费网站| 亚洲欧洲在线观看| 一级人做人a爰免费视频 | 国产小视频在线免费| 国产成人亚洲综合无码精品 | 99在线视频免费观看| 好男人视频社区精品免费| 亚洲va在线va天堂va888www| 一级毛片正片免费视频手机看| 丁香花在线观看免费观看| 好看的电影网站亚洲一区| 最好2018中文免费视频| 大地资源免费更新在线播放| 久久精品国产亚洲av麻豆小说| 中文字幕在线观看免费| 亚洲M码 欧洲S码SSS222| 亚洲AV无码成人精品区狼人影院 | 91制片厂制作传媒免费版樱花| 亚洲无线观看国产精品| 亚州**色毛片免费观看| 免费在线观看污网站| 国产精品亚洲五月天高清| 国产精品成人免费一区二区| 亚洲一区二区三区在线观看蜜桃| 午夜精品射精入后重之免费观看|