熒光核酸染料

熒光核酸染料

【產(chǎn)品名稱】 ：核酸染料

【產(chǎn)品規(guī)格】 ：0.5ml 

【儲存條件】 ：常溫保存

【有效期】 ：見標(biāo)簽 

【產(chǎn)品簡介】 ：

GelRed 和GelGreen 是兩種集高靈敏、低毒性和超穩(wěn)定于一身的熒光核酸凝膠染色試劑。其水溶染色劑通過美國環(huán)保局安全認(rèn)定，廢棄物可直接倒入下水道，而不會造成任何環(huán)境污染。目前大多數(shù)商業(yè)化的核酸染料（凝膠染色試劑）總是在安全性、穩(wěn)定性和靈敏性等方面不令人滿意。例如，雖然 EB (溴化乙啶）作為目前使用的核酸凝膠染色試劑，能夠在多數(shù)應(yīng)用中提供可以接受的靈敏度，但它是一種高誘變性的化學(xué)物質(zhì)。而且EB染色后具有較高的背景熒光信號。 SYBR Green I 和 SYBR Gold 也被廠家宣傳的凝膠染色試劑。但 SYBR Green I 尤其是 SYBR Gold 在常用的微堿性電泳緩沖溶液或預(yù)制凝膠中會快速降解，穩(wěn)定性差導(dǎo)致染色效果極不可靠。 SYBR safe 被認(rèn)為是市場上較為安全的核酸染料 ，但它的染色效果還遠(yuǎn)不及 SYBR Green I 。

Solargel Red是一種靈敏、穩(wěn)定和相對安全的熒光核酸染色試劑。它可以替代高毒性染色劑－溴化乙錠（EB），用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠中dsDNA和ssDNA的染色。Solargel Red的靈敏度遠(yuǎn)高于EB，并且不需要脫色。由于Solargel Red和EB有相同的光譜特性，因此用它替代EB時不需要更換成像系統(tǒng)。既可用于預(yù)制凝膠也可用于電泳后染色。通常電泳后染色的靈敏度更高，并能排除染料對DNA遷移的干擾。使用Solargel Red進行電泳后染色，操作簡單不需要脫色和特殊溶液。只要將染料稀釋在0.1MNaCl中，并將凝膠置于染色液中，30分鐘后就可以觀察。染色液在室溫下極為穩(wěn)定，可以多次反復(fù)使用。相比而言，預(yù)制凝膠由于不需要額外染色過程，因此染料用量更少，更為簡單經(jīng)濟。

本產(chǎn)品僅供科研實驗用，不做其它用途！

【染色特點】 ：

1、無毒性：Solargel Red的油性和大分子量特點使其不能穿透細(xì)胞膜進入細(xì)胞內(nèi)，艾姆斯氏試驗結(jié)果也表明，該染料的誘變性遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于EB。

2、靈敏度高：適用于各種大小片段的電泳染色，對核酸遷移的影響小于SYBR Green I。

3、穩(wěn)定性高： 適用于使用微波或其它加熱方法制備瓊脂糖凝膠;室溫下在酸或堿緩沖液中極其穩(wěn)定，耐光性強。

4、信噪比高：樣品熒光信號強，背景信號低。

5、操作簡單：與 EB 一樣，在預(yù)制膠和電泳過程中染料不降解;而電泳后染色過程也只需30 分鐘且無需脫色或沖洗 ，即可直接用紫外凝膠透射儀觀察。

6、適用范圍廣：可選擇電泳前染色(膠染法)或電泳后染色(泡染法);適用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳;可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。

與EB有相同的光譜特性，無需改變?yōu)V光片及觀察裝置：標(biāo)準(zhǔn)的 EB 濾光片或 SYBR 濾光片都適用，使用與觀察EB相同的普通紫外凝膠透射儀觀察即可。但是Solargel Red不能被488 nm氬離子激光器或相似波長的可見光激發(fā)，因此不推薦使用此類激發(fā)裝置的成像系統(tǒng)。對于此類裝置，我們推薦您使用gelred ，它和SYBR Green I的光譜相似，靈敏度相當(dāng)，但更加穩(wěn)定。

Solargel Red 使用方法簡介

1.膠染法(用法同EB)(推薦方法)

(1) 制膠時加入Solargel Red核酸染料(例如：每50mL 瓊脂糖溶液中加入5μL Solargel Red10,000× 儲液，以此比例類推)。

(2) 按照常規(guī)方法進行電泳。

【注意事項】 ：

(1) 此方法染色染料用量相對較少。500 μL染料大約可以做100塊 50mL的膠。

(2) 由于Solargel Red具有良好的熱穩(wěn)定性，可以在熱的瓊脂糖溶液中直接添加，而不需要等待溶液冷卻。搖晃，振蕩或者翻轉(zhuǎn)以保證染料充分混勻。也可以選擇將Solargel Red儲液加到瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中，然后用微波爐或其他常用方式加熱以制備瓊脂糖凝膠。gelred兼容所有常用的電泳緩沖溶液。

(3) 如果總是看到條帶彌散或分離不理想，建議使用泡染法染色以確認(rèn)問題是否與染料有關(guān)。如果染色后問題依舊存在，則說明問題與染料無關(guān)，請嘗試：降低瓊脂糖濃度;選用更長的凝膠;延長凝膠時間以保證邊緣清晰;改進上樣技巧或選擇泡染法染色。

(4) 此方法不適合預(yù)制聚丙烯酰胺凝膠，對于聚丙烯酰胺凝膠請使用泡染法。

2.泡染法

(1) 按照常規(guī)方法進行電泳。

(2) 用H2O將Solargel Red10,000× 儲液稀釋約3,300倍到0.1M NaCl中，制成3× 染色液。(例如將15μL Solargel Red 10,000× 儲液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。

(3) 將凝膠小心地放入合適的容器中，如聚丙烯容器中。緩慢加入足量的3× 染色液浸沒凝膠。室溫振蕩染色30min左右，染色時間根據(jù)凝膠厚度以及瓊脂糖濃度不同而略有不同。對于含3.5～10%丙烯酰胺的凝膠，染色時間通常介于30min到1h，并隨丙烯酰胺含量增加而延長。

(1) 用泡染法染色時，染料用量較多。單次使用的染色液可重復(fù)使用3次左右。

(2) 3×Solargel Red染色液可以大量制備，在室溫下避光保存直至用完。

【特別提醒】 ：

(1) 如果您使用的是紫外成像儀，請選擇Solargel Red ;如果您使用激光成像儀或希望在可見光下觀測，請選擇Solargel Red。

(2) 在極少數(shù)情況下，質(zhì)粒經(jīng)某些酶切后的DNA樣品會出現(xiàn)拖尾和分辨率降低，此時建議同時嘗試兩種染色方法以決定哪種方法更加合適。

熒光核酸染料