銀染色實驗代測

鍍銀染色實驗代測

鍍銀染色實驗簡介：

鍍銀染色改良bielschowsky法。鍍銀染色主要染神經軸突，神經細胞內原纖維，神經原纖維纏結，老年斑呈黑色，背景金黃色。常用于研究老年性癡呆等神經細胞原纖維的病理改變，了解神經纖維有無變性，破壞的程度。

鍍銀染色實驗步驟（僅供參考）：

1、 石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ10min-無水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸餾水洗。

2、硝酸-銀反應：切片浸入20%硝酸-銀加蓋于暗處反應20min。

3、蒸餾水洗（在此期間配制銀氨溶液）：染色第2步用過的20%硝酸-銀，逐滴加入氫氧化銨，邊滴邊攪拌，直到開始形成的白色沉淀又消失，銀液變清即為銀氨溶液。

4、 銀氨液處理：切片浸入銀氨液作用15min（在此期間配制稀氨水，銀氨液用于下步配制顯影工作液）。稀氨水配制：蒸餾水30ml加氫氧化銨3滴。

5、 稀氨水中浸泡：切片移入稀氨水中浸泡（在此期間配制顯影工作液）。

顯影儲備液：甲醛液20ml+蒸餾水100ml+硝酸1滴+檸檬酸0.5g。

顯影工作液：取第4步用過的銀氨液30ml，加入顯影儲備液3滴，混合均勻，即配即用不能保存。

6、 顯色：切片浸入顯影工作液中顯色，約3-7min，鏡下控制顯色，金黃色的背景，神經纖維呈黑色時即取出。切片浸入第5步用過的稀氨水中浸泡1min。流水沖洗1min。

7、 去除未反應的銀離子：5%硫代硫-酸鈉處理2min（固定已反應的銀鹽和除去未反應的銀離子）。流水沖洗5min。

8、 脫水封片：將切片依次放入95%酒精I 5min -95%酒精II 5min-無水乙醇Ⅰ5min -無水乙醇Ⅱ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min中脫水透明，將切片從二甲苯拿出來稍晾干，中性樹膠封片。

9、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。

 染色結果：神經軸突，神經細胞內原纖維，神經原纖維纏結，老年斑及樹突呈黑色，背景金黃色。

鍍銀染色實驗代測